C18液相色譜柱壞了？那是你沒(méi)有保護好
C18液相色譜柱是基于溶質(zhì)、極性流動(dòng)相和非極性固定相表面間的疏水效應建立的一種色譜模式，任何一種有機分子的結構中都有非極性的疏水部分，這部分越大，一般保留值越高，在液相色譜中這是應用面較廣的一種分離模式，在生物大分子的反相液相色譜條件下，流動(dòng)相多采用酸性的、低離子強度的水溶液，并加一定比例的能與水互溶的異丙醇、乙腈或甲醇等有機改性劑，大量使用的填料為孔徑在30納米以上的硅膠烷基鍵合相，除此之外，也有少量高聚物微球。
在液相色譜柱的使用中，我們會(huì )發(fā)現很多實(shí)驗室會(huì )面臨C18液相色譜柱頻繁損壞的問(wèn)題。那么，我們該如何預防呢？
1、在液相系統中加入在線(xiàn)過(guò)濾器
在線(xiàn)過(guò)濾器的內部顆?？障兑话闶?.5微米，對于UHPLC會(huì )選擇0.2微米空隙的在線(xiàn)過(guò)濾器。這個(gè)空隙尺寸和柱頭的過(guò)濾篩板尺寸接近或者略小。所以，在線(xiàn)過(guò)濾器能夠有效的阻隔來(lái)自樣品、泵頭密封墊、自動(dòng)進(jìn)樣器的轉子密封墊的顆粒物，以防止柱頭過(guò)濾篩板的堵塞。
注意：但是對于非常低死體積的液相系統，在線(xiàn)過(guò)濾器的加入可能會(huì )導致系統死體積增大峰展寬變嚴重的問(wèn)題。而對于大多數的液相系統而言，色譜圖不會(huì )有太大變化。
2、在C18液相色譜柱前端使用保護柱
保護柱有很多種，通用型、一體式、卡套式，但是它其實(shí)是一個(gè)和分析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。因為它具有和分析柱相同的內部填料，所以保護柱不僅可以阻隔顆粒物，還可以阻隔易吸附的樣品基質(zhì)組分。
注意：由于保護柱中可能有大量的強保留組分，在用強溶劑清洗系統時(shí)請取下保護柱，以防止這些強保留組分被洗脫進(jìn)分析柱。保護柱如果出現吸附飽和也可能會(huì )對分離效果有影響
3、對樣品進(jìn)行凈化處理
有一些液相的分析方法沒(méi)有明確標注樣品的凈化，但我希望大家在使用C18液相色譜柱做分析時(shí)都能夠考慮樣品的凈化，常用的方案是對樣品進(jìn)行過(guò)濾。
